Virologi

PEMERIKSAAN

HBsAg

A.    Metode pemeriksaan

Metode pemeriksaan HbsAg adalah immuoassay choromatograpic

B.     Tujuan pemeriksaan

Adalah untuk mendeteksi antigen virus hepatitis B pada permukaan serum atau plasma secara cepat dan kualitatif

C.     Dasar teori

Hepatitis virus adalah  penyakit sistematik terutama melibatkan kasus liver.sebagian besar dari penyebab hepatitis akut disebabakan oleh virus hepatitis.antigen kompleks yang ditemukan pada permukaan HBV disebut HbsAg.sebutan pertama kali untuk penyakit ini adalah Australia karena ditemukan pada serumorang Australia.adanya HbsAg pada serum atau plasma adalah indikasi yang aktif untuk infeksi Hepatitis B,dengan pilihan akut atau cronic.HbsAg akan terdekteksi 2 sampai 4 minggu sebelem ALT meningkat menjadi abnormal dan 3 sampai 5 minggu, sebelum menunjukan gejala atau ikterus mengembang. HbsAg memiliki 4  subtipe utama : adw,ayw,Adr dan ayr. Karena determina antigen heterezigot ada 10 subtipe utama dari Hepatitis virus B.

Satu langka HbsAg  virus hepatitis B pada permukaan serum atau plasma adalah suatu test cepat untuk mendeteksi kehadiran dari HbsAg dalam serum atau plasma specimen secara kuantitatif.test ini memanfaatkan sebuah kombinasi dari antibodi monogonal dan poligonal untuk mendeteksi secara selektif tingkat tinggi dari HbsAg dalam serum atau plasma.

D.    Prinsip

HbsAg satu langkah hepatitis B test strip permukaan antigen pada serum atau plasma  adalah sebuah kulitatif,aliran 

E.     REAGENTS

Strip test berisi partikel  anti- HbsAg dan  dilapisi membrane anti- HBsAg

F.      ALAT DAN BAHAN YANG DIGUNAKAN

1.      Test strip

2.      Serum atau plasma

3.      Timer

Gambar, strip pemeriksaan HbsAg

G.    CARA KERJA

Test strip dapat dilakukan jika,serum atau plasma spesimen,dan control untuk kalibirasi berada pada ruangan dengan suhu (15-30)⁰ sebelum dilakukan test

1.      Ambil bungkusan strip  pada suhu ruangan sebelum bungkusan tersebut dibuka.buka bungkusan strip pemeriksaan sebaiknya dilakukan tidak lebih dari 1 jam

2.      Masukan strip kedalam serum atau plasma yang telah dimasukan kedalam tabung yang mudah di amati,biarkan  10-15 detik dalam serum.batas serum jangan sampai pada MAX LINE.

3.      Keluarkan strip dan jalankan stopwatch,biarkan samapai 15 menit kemudian baca hasilnya,samapai muncul garis merah.

4.      Hasil pemeriksaan

 

 Hasil positif                                         hasil negatif

H.    INTERPRETASI HASIL

Positive : jika muncul 2 garis merah,satu garis di wilaya kontrol dan satu garis di wilaya test.

Catatan :  kelebihan dari garis diwilaya test akan berubah –ubah tergantung pada konsentrasi dari kondisi HbsAg spesimen.

Negative :satu garis merah di daerah control.

Invalid : tidak ada garis yang muncul di kontrol.

PEMERIKSAAN HCV

A.    METODE PEMERIKSAAN

Metode pemeriksaan adalah immunosay cromatografi

B.     TUJUAN PEMERIKSAAN

Tujuan pemeriksaan adalah untuk mendeteksi antibody virus Hepatits C di serum atau plasma.

C.     DASAR TEORY

Virus Hepatitis C adalal virus yang kecil atau sederhana,memiliki selubung,untaian RNA virus yang tunggal. Penyakit Hepatits C penyebab utama penyakit ini dari keturanan bukan perpindahan dari Hepaitits A atapun Hepatits B.

Antibody untuk hepatitis C ditemukan lebih dari 80% pasien terbukti bukan hepatits A atau Hepaitis B

Lazimnya metode dengan cara menanamkan  kultur sel virus atau melihat atau mengambarkan pengandaan  gen virus untuk sangat tidak mungkin untuk perkembangan test  serologi menggunakan rekombinan antigen.dibandingkan dengan generasi pertama Hepatitis C, EIAs menggunakan rekombinan antigen tunggal, antigen ganda menggunkan rekombinan protein dan sintesis peptida ditambah dengan test serologis yang baru untuk menghindari tidak reaksi silang yang tidak spesifik dan untuk meningkatkan sensifitas dari test antibodi Hepatitis C.

Satu langkah pemeriksaan Hepatitis C adalah   test secara cepat untuk mendeteksi adanya antibodi hepatitis C pada serum atau plasma spesimen.Test ini memanfaatkan kombinasi yang dilapisi partikel  protein dan rekombinan protein Hepatitis C secara selektif mendeteksi antibodi Hepatitis pada serum atau plasma.rekombinan protein virus  hepatitis C digunakan ditest dikodekan dengan menggunakan gen untuk dua struktural ( kapsul  nukleat)  dan protein non struktural.

D.    PRINSIP

Satu langkah test virus Hepatitis C adalah berdasarkan membrane imunsoay untuk mendeteksi antibodi HCV diserum atau plasma secara kualitatif. Membrane dilapisi dengan rekombinan antigen virus di wilaya garis test dari perangkat.selama test, serum dan plasma spesimen bereaksi dengan protein partikel yang dilapisi. Campuran serum dan protein partikel pada membrane dipindahkan ke atas dengan reaksi daya kapilari   dengan rekombinan antigen Hepatitis C di membrane dan menghasilkan garis yang berwarna.dengan adanya garis warna ini menunjukan hasil positif.untuk  disekitar daerah kontrol,  garis warna akan selalu muncul di wilaya garis kontrol indikasi volume spesimen tepat.

E.     REAGENTS

Alat test yang berisi protein A yang dilapisis partikel dan  antigen HCV dilapisi pada membrane

F.      ALAT DAN BAHAN

Serum atau plasma

Ppipet teets sekali pakai

Stopwatch

G.    CARA KERJA

1.      Sebelum melkukan ntest spesimen.buffer atau kontrol disesuaikan dengan suhu ruangan ( 15-30)⁰C sipa untuk de periksa.

2.      Keluarkan strip dari bunkusan dan gunakan strip itu segera               mungkin paling lama 1 jam.

3.      Temapt meletakan alat harus bersih dan permukaan yangagak tinggi. Pindahkan spesimen dengan pipet.

·         Pipet 5 µl serum atau plsama untuk spesimen yang baik.pada strip test.tambahkan buffer lebih kurang 80µl dan jalankan stopwatc.

 buffer

·         Untuk beberapa saat samapi garis merah muncul. Dan baca setelah 10 menit.jangan biarkan sampai 20 menit.

H.    INTERPRETASI HASIL

Positif  : 2 garis merah muncul pada wilaya garis test

Negative : 1 garis merah yang muncul pada wilaya kontrol

Invalid : tidak ada garis yang muncul pada wilaya control.

I.       HASIL : negative

                 wilayah control

Wilayah test